HbF的抗碱性及抗酸性都较正常血红蛋白(HbA)为强，因此，血片经酸洗脱后，含HbF的红细胞因抗酸而不被脱色，能被伊红染成红色。含HbA或只含及少量HbF的红细胞则被酸洗脱，仅留下红细胞膜的空影。
着色细胞0～<1%。
新生儿 2/3。
(1)多数红细胞染成红色β-地中海贫血重症型。
(2)少数红细胞染成红色β-地中海贫血轻症型、再生障碍性贫血、溶血性贫血。
(3)染色深遗传性HbF增多症纯合子型。
(4)染色浅遗传性HbF增多症杂合子型。
(5)染色深浅不均匀β-地中海贫血轻症型。
(1)血片制成后，在2h内染色，否则可出现假阳性反应。要求涂片薄，细胞平铺分散。
(2)缓冲液的pH、温度、洗脱时间应严格控制，否则影响测定结果。
(3)也可用稀释瑞氏染色液作对比染色。
(1)按常规法制备血涂片，自然干燥1h，再用80%乙醇固定5min(柠檬酸盐抗凝血在4℃冰箱内保存3天可以使用)，水洗待干。
(2)将固定后血膜放37℃，pH3.3的磷酸盐柠檬酸缓冲液中，保温浸洗5min。
(3)冲洗干燥后，在苏木素染色液中染白细胞1min，以免误认为阳性红细胞。
(4)水洗后，用伊红染液染红细胞1min，再水洗，干后镜检。
(5)在油镜下，含有Hb F的红细胞被伊红染液染成鲜红色，为阳性红细胞;仅留下淡影的细胞膜为阴性红细胞。计数1000个红细胞中阳性红细胞所占百分率。
血友病及弥漫性血管内凝血者。
感染的风险：如果使用了不洁针头穿刺就有可能有感染的风险。